0,76 Mb.страница4/5Дата конвертации13.10.2011Размер0,76 Mb.Тип ... Смотрите также: 4 ^ Качественный анализ 1. Лактонная проба (предложена Г.А.Кузнецовой). Параллельно проводят контрольный опыт. Методика: 1 мл извлечения, содержащего кумарины, наливают в две пробирки. В одну добавляют 0,5 мл 10%-ного раствора натрия гидроксида. Обе пробирки нагревают на водяной бане, затем в обе прибавляют 4 мл дистиллированной воды и хорошо перемешивают. Если в пробирке, куда добавляли щелочь, раствор остался желтым и прозрачным, значит, реакция положительная, так как образуется желтая растворимая в воде соль кумаровой кислоты. В контрольной пробирке при добавлении воды раствор мутнеет, кумарины не растворяются в воде и выпадают в осадок. ^ При подкислении щелочного раствора лактонное кольцо замыкается и кумарины выпадают в осадок. 2. Реакция образования азокрасителя. Реакция проводится с продуктами, полученными после реакции разрыва лактонного кольца. Методика: В пробирку добавляют 1 мл свежеприготовленного диазореактива. Чаще всего, в качестве диазореактива используют диазосульфаниловую кислоту. Образуется азокраситель от желтого до вишнево-красного цвета. Для идентификации кумаринов используют методы бумажной и тонкослойной хроматографии. При этом используют системы растворителей: - н-бутанол-уксусная кислота-вода БУВ (4:1:5) - н-гексан-бензол-метанол (5:4:1); - петролейный эфир-бензол-метанол (5:4:1); Идентифицируют кумарины по характерной флюоресценции в УФ свете или проявляют хромогенными реактивами. В качестве проявляющих реактивов служат 1%-ный спиртовый раствор алюминия хлорида, 10%-ный раствор щелочи или пары аммиака. Широкие возможности для обнаружения в растениях и сырье кумаринов, не только их суммы, но и отдельных соединений, открылись после внедрения хроматографического анализа. При этом указанные реактивы используют и для обработки хроматограмм. 4. Хроматографические методы удобны для выделения индивидуальных кумаринов. ^ Количественное определение. Для количественного определения кумаринов в лекарственном РС используют гравиметрические, титриметрические и физико- химические методы анализа. По существующей нормативной документации для количественного определения кумаринов в лекарственном растительного сырье используют физико-химические методы анализа. 1. Полярографический метод. Определение кумаринов в плодах пастернака. Основан на восстановлении кумаринов на ртутно-капельном электроде в альфа-пироновом кольце по месту двойной связи в положении 3,4. Присоединяют галоген - йод, в качестве реактива используют тетраэтиламмоний йодид. Содержание комариное в пересчете на ксантотоксин не менее 1%. Спектрофотометрический метод. Основан на способности кумаринов поглощать монохроматический свет при определенной длине волны в зависимости от концентрации исследуемого раствора. Используют для определения содержания простых кумаринов в траве донника лекарственного (не менее 0.4%) и пиранокумаринов в корневищах и корнях вздутоплодника сибирского (не менее 3 %). Получают хлороформное извлечение из сырья и измеряют у него оптическую плотность с помощью спектрофотометра. 3. Хроматоспектрофотометрический метод. Применяют для определения содержания фуранокумаринов в плодах амми большой, псоралеи костянковой, листьях инжира. Стадии определения: 1. Получение хлороформного извлечения из сырья. 2. Разделение суммы кумаринов методом хроматографии на бумаге в системе растворителей, указанной в нормативной документации. 3. Идентификация кумаринов в УФ-свете по характерному свечению. 4. Элюирование веществ с бумаги. Каждое вещество отдельно элюируют 95 %-ным этанолом. 5. Измерение оптической плотности растворов с помощью спектрофотометра при длине волны, указанной в нормативной документации. 6. Расчет содержание каждого соединения с учетом удельного показателя поглощения. Плоды амми большой: бергаптена и изопимпинеллина не менее 0,6 %. Плоды псоралеи костянковой: псоралена и изопсоралена не менее 0,9 %. Листья инжира: псоралена и бергаптена не менее 0,7%, отдельно псоралена менее 0,42 %. 4. ^
Методы анализа биологиче c ки активных веществ и их свойства 4 чел. помогло.
Качественный анализ - Методы анализа биологиче c ки активных веществ и их свойства
Комментариев нет:
Отправить комментарий